Anti HIV 1+2 EIA test
Vitros anti-HIV 1+2 assay
HIV 全名 human immunodeficiency virus，本實驗利用 chemoluminescence immunoassay（CIA）去偵測 HIV-1 and HIV-2 。
前言：
HIV-1 的感染是全球性的，而 HIV-2 則僅在西非以及某些歐洲國家有報告；這兩種病毒在他們的 core protein 上表現出具有價值的抗原交叉反應，在 envelope glycoprotein 上則只有較小的交叉反應。為了確定在感染病毒的所有時期都可以偵測到病毒抗體，除了利用主要的 core protein 交叉反應外也必須要使用到兩種病毒的 envelope glycoprotein 的抗原決定部位。從喀麥隆以及歐洲所得的 sample 中鑑定出的 HIV-1 變種 ---Group O- 其與常見的 HIV-1 subtype---Group M- 之間有很大的差異性。這種病毒的 envelope region 的特殊抗原決定部位可以用來偵測 Group O 的感染，其與 HIV subtype 之間的 cross reaction 卻不足夠用來判斷為 Group O 的感染。感染的早期先出現 HIV IgM 抗體，而後出現 IgG 抗體，因此可以同時偵測 IgM 與 IgG 其 sensitivity 可達最好。
Vitros anti-HIV 1+2 assay 是用來偵測 HIV-1/HIV-2 抗體並作為血液篩檢及診斷用途。 這個方法利用了兩個 HIV-1 重組膜蛋白 , 一個 HIV-1 重組核心蛋白和一個 HIV-2 重組膜蛋白作為包被抗原。可以提高分析的專一性 , 避免因為人類細胞蛋白的所引起的干擾。 使用的標本為懷疑感染的血清或血漿。
原理：
Vitros Anti-HIV 1+2 assay 是使用 Vitros Immunodiagnostic system 中之 Vitros Anti-HIV 1+2 試藥組及 Vitros HIV 1+2 校正液。
此試驗係採用 immunometric bridging 方法 , 其包含兩階段的反應。在第一階段中 , 檢體中之 HIV 抗體與包被在反應杯中之重組抗原互相結合 , 未結合的檢體則將之洗去。第二階段時 , 一種以 horseradish peroxidase ( HRP ) 標示過的 HIV 重組抗原偶合劑被加入 , 偶合劑會與剛才於第一階段中捕獲之人類 HIV-1 或 HIV-2 ( IgG 和 IgM) 抗體結合 , 同樣的亦將未結合的部份洗去。
此已結合之 HRP 偶合劑則利用冷光反應來偵測。將一種含有冷光基質 ( luminol 衍生物及過酸鹽 ) 的試劑和一種電子轉移原加入反應杯中 , 此時已結合之偶合劑會催化此 luminol 衍生物進行氧化反應而產生光 , 而電子轉移原 ( substituted acetanilide ) 則會增加光產生的量並延長其發散 , 這些光訊號則由 Vitros System 來加以讀取 , 此 HRP 偶合劑結合的量即直接正比於 HIV 1+2 抗體存在的量。
|
